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廣州虹科電子科技有限公司
主營產(chǎn)品： PROFIBUS/PROFINET 通訊網(wǎng)關(guān)，板卡，診斷工具，以及自動化配件，CAN/CANOPEN 接口卡，開發(fā)工具，示波器，記錄儀 |
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2025-6-21 閱讀(8)
蛋白質(zhì)是組成生物細(xì)胞、組織的重要成分，生物的所有生命活動都離不開蛋白質(zhì)的參與。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成細(xì)胞的基本有機(jī)物，是生命活動的主要承擔(dān)者。生物材料中蛋白質(zhì)含量的測定是生物學(xué)研究中最重要也是最基本的實驗操作之一，目前常見的測定方法有考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)、紫外吸收法、雙縮脲法（Biuret法）、Folin-酚試劑法（Lorry法）、二喹啉甲酸法（BCA法）和凱式定氮法（Kjedahl法）等。每種方法原理不同，操作不同，都有其優(yōu)點和局限性。
本文介紹的是考馬斯亮藍(lán)法，即Bradford法測定蛋白質(zhì)的相關(guān)內(nèi)容，它是通過染色方法測定溶液中蛋白質(zhì)濃度的方法，是目前迅速可靠且靈敏度的蛋白質(zhì)測定方法之一。
Bradford蛋白質(zhì)測定法是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料結(jié)合的原理設(shè)計的?？捡R斯亮藍(lán)染料（G-250）在酸性溶液中與蛋白質(zhì)的堿性氨基酸和芳香族氨基酸殘基結(jié)合，使得染料的光吸收峰位置由原來的465nm變?yōu)?95nm，溶液顏色也由原來的棕紅色變?yōu)樗{(lán)色，反應(yīng)迅速且穩(wěn)定，形成的化合物顏色深淺在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)濃度成正比關(guān)系，因此可通過測定結(jié)合染色后溶液在595nm處的光吸收度值來計算溶液中蛋白質(zhì)的含量。
通過分光光度計先測定已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液染色后在波長595nm的吸光度A595并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后測定同樣染色后的待測蛋白溶液在波長595nm的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出待測蛋白質(zhì)的濃度。
點成DEN-600光度計， 是一款緊湊、便攜、可電池供電的光度計，可以方便地放置在生物安全柜、培養(yǎng)箱中，該設(shè)備可容納10mm光程的標(biāo)準(zhǔn)比色皿、普通圓底試管或離心管等。USB連接和DEN軟件可進(jìn)行數(shù)據(jù)傳輸、數(shù)據(jù)處理和計算。600 nm波長光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計可以進(jìn)行如下測量：估算細(xì)胞總數(shù)（OD600）、濁度測量（McFarland單位）、蛋白質(zhì)濃度測量（Bradford 蛋白質(zhì)測定法）。分光光度計通常應(yīng)用于這些領(lǐng)域，因此DEN-600可作為分光光度計的平價替代品。
