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蛋白質(zhì)含量中檢測(cè)方法的利與弊

來源:深圳市芬析儀器制造有限公司   2021年12月10日 10:19   720
  蛋白質(zhì)分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質(zhì)對(duì)280nm的光波具有吸收值,在一定的范圍內(nèi),蛋白質(zhì)溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測(cè)定。該法操作簡單、快捷,并且測(cè)定的樣品可以回收,低濃度鹽類不干擾測(cè)定結(jié)果,故在蛋白質(zhì)和酶的生化制備中廣泛被采用。但此方法存在以下缺點(diǎn):
 
  1.當(dāng)待測(cè)的蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸殘基含量差別較大會(huì)產(chǎn)生一定的誤差,故該法適用于測(cè)定與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)氨基酸組成相似的樣品。
 
  2.若樣品中含有其他在280nm吸收的物質(zhì)如核酸等化合物,就會(huì)出現(xiàn)較大的干擾。但核酸的吸收高峰在260nm,因此分別測(cè)定280nm和260nm兩處的光吸收值,通過計(jì)算可以適當(dāng)?shù)南怂釋?duì)于測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的干擾作用。但因?yàn)椴煌牡鞍踪|(zhì)和核酸的紫外吸收是不同的,雖經(jīng)校正,測(cè)定結(jié)果還存在著一定的誤差。
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