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在生物醫(yī)學(xué)研究和生物制造等領(lǐng)域，細胞尺寸可是個關(guān)鍵參數(shù)。它就像細胞的 “健康密碼”，能反映細胞的健康狀況和質(zhì)量。在生物制造過程中，細胞尺寸更是評估批次培養(yǎng)細胞質(zhì)量、細胞治療原料質(zhì)量的重要依據(jù)。所以，能精準測量細胞尺寸的自動細胞計數(shù)儀，對相關(guān)研究和生產(chǎn)來說至關(guān)重要。
點成 LUNA-III™自動細胞計數(shù)儀，繼承了 LUNA™系列設(shè)備的標準尺寸分選功能，不僅能高精度地測量細胞尺寸，還能在計數(shù)過程中及計數(shù)后，對細胞群體進行分類分析。今天，就來給大家詳細講講，這款儀器在六種 NIST 可溯源粒徑標準及 3T3 細胞系上的測量精度和尺寸分選能力。
#細胞系與試劑 #
本次實驗選用 3T3 細胞系，培養(yǎng)基是含有 10% 胎牛血清和 1% 的 DMEM。我們用 0.4% 臺盼藍（貨號 T13101）來評估細胞存活率。另外，為了驗證儀器尺寸測量的精度，還準備了六種 NIST 可溯源粒徑標準，它們的粒徑分別是 9.98、20.85、30.04、43.33、50.00 和 57.43 µm。
#基于 NIST 可溯源粒徑標準的精度驗證 #
NIST 可溯源粒徑標準由美國國家標準與技術(shù)研究院(NIST)提供，可作為的測量基準?使用這些標準顆粒評估點成 LUNA-III™ 的測量精度,結(jié)果表明其尺寸測量準確度達 95.2% 以上，進一步驗證了 其在尺寸測量中的高精度(圖1)?
圖 1:(A)點成LUNA-III™ 計數(shù)的NIST 可溯源粒徑標準(NT27N?NT30N?NT32N?NT33N?NT34N?#64200)圖像,紅色圓圈標示檢測出的顆粒?(B)表格對比NIST 標準粒徑尺寸與點成LUNA-III™測量值及其精度百分比?(C)散點圖顯示了點成LUNA-III™測量值與NIST 標準值的線性關(guān)系,R2 值達0.9999,表明其具備的線性度和準確性?
#細胞尺寸測量 #
為了評估點成LUNA-III™的尺寸測量準確性，我們混合了六種NIST可溯源粒徑樣本，并將計數(shù)范圍設(shè)定在 1 µm 至 90 µm 之間。計數(shù)完成后，系統(tǒng)生成細胞濃度與尺寸分布直方圖，并精準分類各尺寸標準顆粒。利用靈活的尺寸分選功能，可在計數(shù)后立即調(diào)整尺寸范圍，對目標尺寸進行精確標定，使測量準確度超過98%。
圖 2：點成LUNA-III™在不同尺寸范圍（8~12 µm、18~22 µm、28~32 µm、41~45 µm、48~52 µm、55~59 µm）內(nèi)對NIST標準顆粒進行檢測與尺寸分選的示例圖，每個圖像均配有相應(yīng)的直方圖，以展示粒徑分布情況。
#3T3 細胞尺寸測量 #
為了評估點成LUNA-III™根據(jù)尺寸篩選3T3細胞（已知尺寸約18 µm）的能力，我們設(shè)定了多個尺寸分選范圍7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm、16~20 µm（圖 3）。結(jié)果顯示，點成LUNA-III™能精準檢測并篩選符合各尺寸范圍的3T3細胞，同時相應(yīng)的直方圖也清晰展示了細胞尺寸分布情況，證明其在不同尺寸范圍內(nèi)均能實現(xiàn)可靠、精準的測量。
圖 3：點成LUNA-III™計數(shù)的3T3細胞圖像，顯示細胞在 7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm和16~20 µm之間的尺寸分選情況，橙色圓圈標示檢測到的細胞。相應(yīng)直方圖展示了各尺寸范圍內(nèi)的細胞分布情況。
點成LUNA-III™自動細胞計數(shù)儀可提供精準、可靠的細胞尺寸測量。在NIST可溯源粒徑標準的驗證下，其測量準確度達95.2%以上，并成功對混合粒徑顆粒及3T3細胞進行精準分類和尺寸分選，準確度超過98%。
點成LUNA-III™具備以下優(yōu)勢：
精準測量：適用于各種顆粒尺寸和細胞類型
可靠分選：確保細胞群體的精確分類
高重復(fù)性：測量結(jié)果一致性強
這些優(yōu)勢使點成LUNA-III™自動細胞計數(shù)儀成為細胞尺寸、健康狀況和質(zhì)量評估的理想工具。
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